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德國默克試劑盒如何規(guī)避假陽性結果

更新時間:2014-12-26   點擊次數(shù):1565次
     德國默克試劑盒即酶聯(lián)免疫吸附試驗,是一種常用的固相酶免疫測定方法。 由于ELISA方法靈敏,特異性強不需要特殊設備,所以被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。但ELISA測定中影響因素較多,德國默克試劑盒而且其操作中有一定的技術要求,在臨床檢驗中除正常反應外,有時??梢姷揭恍╁e誤結果(即假陽性或假陰性)如標本的影響上海勁馬為大家解讀ELISA檢測的影響因素。
    溶血標本及混有紅細胞的血清采用ELISA法檢測易產(chǎn)生假陽性。可能是溶血血清中含有過氧化酶物質(紅細胞或血紅蛋白中的亞鐵血紅素),德國默克試劑盒在洗滌過程中往往難以*洗脫,德國默克試劑盒它可使H2O2釋放出原生態(tài)氧(O),從而催化底物四甲基聯(lián)苯胺生成可溶性的有色物質,即顯藍色,產(chǎn)生假陽性[。所以嚴重溶血標本禁用。
    標本受細菌污染。因菌體中可能含有內源性辣根過氧化物酶,因此,德國默克試劑盒被細菌污染的標本同溶血標本一樣,亦可產(chǎn)生非特異性顯色而干擾測定結果,標本保存不當。在冰箱中保存過久的標本,在間接法ELISA測定中會導致本底過深、造成假陽性;為克服上述干擾,德國默克試劑盒測定的血清標本宜為新鮮采集;如不能立即測定,5 d內測定的血清標本可存放于4℃,1周后測定的血清標本應低溫凍存;凍存后融解的標本,蛋白質局部濃縮,分布不均,應充分混合后再測定,但混勻時應輕柔,不可強烈振蕩。
    制備德國默克試劑盒的方法步驟:
    1、抗原表位的計算機篩選;
    2、抗原的制備;
    3、血清的采集;
    4、間接ELISA方法的建立;
    5、間接ELISA方法的敏感性和特異性驗證;
    6、德國默克試劑盒的穩(wěn)定性驗證;
    7、對屠宰場進行臨床檢測。該方法簡單、快速、靈敏度高、特異性強、穩(wěn)定性合格、重復性好。應用本發(fā)明制得的試劑盒能有效檢出感染豬的戊型肝炎病毒,德國默克試劑盒適用于大批量發(fā)病樣本的檢測,可用于豬戊肝的快速診斷,并預防、控制豬戊肝病毒的流行和阻斷戊肝病毒由豬向人傳播。
    塑料試管能吸附抗原物質,德國默克試劑盒樣本久置在塑料管內會使樣本內抗原含量下降造成假陰性。使用真空采血管;并使用非抗凝標本,肝素抗凝血漿會增加OD值,EDTA、酶抑制劑(如NaN3)可抑制ELISA系統(tǒng)中辣根過氧化物酶活性。標本凝固不全。在工作中,有時為了爭取時間快速檢測,常在血液還未開始凝固時即強行離心分離血清,使血清中仍殘留部分纖維蛋白原,在德國默克試劑盒過程中可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊,易造成假陽性結果;因此血液標本采集后必須使其充分凝固后再分離血清。